Werkingsprincipe van een fase-contrastmicroscoop (met figuur)

Werkingsprincipe van een fase-contrastmicroscoop (met figuur)!

Licht dat van een object in een ander object met een enigszins verschillende brekingsindex of dikte overgaat, ondergaat een verandering in fase.

In een fasecontrastmicroscoop wordt dit verschil in fase vertaald in variatie in helderheid van het beeld en is dus detecteerbaar met het oog. Met een fase-contrastmicroscoop kunnen de verschillen tussen verschillende cellen met verschillende brekingsindices of -dikte worden gezien in ongekleurde toestand.

Microscopische objecten kunnen in ongekleurde toestand worden waargenomen, vanwege het verschil in brekingsindex van het object en het omringende medium. Ongekleurde structuren in cellen, niet waarneembaar door andere microscopische methoden, kunnen ook worden waargenomen vanwege de kleine verschillen in brekingsindices of dikte.

Een fasecontrastmicroscoop is een samengestelde microscoop uitgerust met een fasecontrastcondensor en een fasecontrastobjectief (figuur 4.12). Een ringvormige opening in het diafragma geplaatst in het brandpuntsvlak van de subtrapscondensor regelt de verlichting van het object.

Het beeld van de opening wordt gevormd op het achterste brandvlak van het objectief. In dit vlak bevindt zich een fase-verschuivend element of faseplaat. De faseplaat heeft ook een ringvormige ring met een faseveranderingspatroon, die de golflengte van het licht dat er doorheen gaat kan vergroten.

Licht dat door de ringvormige opening van de condensor komt, passeert het voorwerp. Die stralen, die niet worden afgeweken door het object (getrokken lijnen in figuur), passeren het fase-veranderende patroon van de faseplaat en verkrijgen een langere golflengte.

Die stralen, die worden afgeweken door de objectstructuren (gebroken lijnen in figuur), vanwege de verschillende brekingsindex, passeren de faseplaat die niet wordt bedekt door het faseveranderingspatroon. Daardoor blijft hun golflengte ongewijzigd. Het verschil in fase (golflengte) geeft het contrast voor een duidelijke zichtbaarheid van het object.