Experiment om de grootte van micro-organismen te meten onder een microscoop (met afbeelding)

Experimenteer om de grootte van micro-organismen onder de microscoop te meten!

Doel:

Micrometrie (micro: microscopisch, metrie: meting) is de meting van de afmetingen van microscopische objecten in termen van lengte, breedte, diameter en dikte. Micro-organismen zijn microscopische objecten, omdat ze niet zichtbaar zijn voor het blote oog en alleen onder de microscoop kunnen worden waargenomen.

Heel vaak is het nodig om hun afmetingen te meten in termen van lengte, breedte en diameter. Vanwege hun kleine afmetingen moet de maat van hun afmetingen onder de microscoop worden gemeten. Het doel van micrometrie is dus om de afmetingen van micro-organismen onder de microscoop te meten.

Beginsel:

Het meten van de afmetingen van micro-organismen gebeurt onder een microscoop met behulp van twee microschalen die 'micrometers' worden genoemd. Beide micrometers hebben microscopische schaalverdelingen die op hun oppervlak zijn geëtst. Een daarvan, de 'oculaire micrometer', is een cirkelvormige glazen schijf die in de ronde plank in het oculair past.

Het heeft willekeurige gradaties geëtst op het oppervlak. De afstand tussen de geëtste gradaties is echter constant voor een bepaalde oogmicrometer. De andere micrometer, 'micrometer voor stappen' genoemd, is een speciale glasplaat die op het microscoopstadium wordt geklikt. Het heeft standaardgradaties geëtst op het oppervlak, die 10 μ uit elkaar liggen.

Calibration:

Met behulp van het vereiste doel worden de schaalverdelingen op de oogmicrometer gekalibreerd tegen de standaardgradaties op de micrometer van het platform. Kalibratie is vereist, omdat de afstand tussen oculaire graden varieert, afhankelijk van het gebruikte doel, wat de grootte van het veld bepaalt.

Voor kalibratie worden beide micrometer-etsen over elkaar heen gelegd door het oculair te draaien. Het aantal oculaire divisies (OD) dat samenvalt met het aantal fase-indelingen (SD) wordt ontdekt.

Hieruit wordt de kalibratiefactor voor één oculaire divisie (OD) als volgt berekend:

Als 10 OD samenvalt met 2 SD, dan

10 OD = 2 SD = 2 x 10 μ = 20 μ (... 1 SD = 10 μ)

1 OD = 20/10 μ = 2 μ

De afstand tussen twee aangrenzende oculaire etsen is dus 2 μ (dwz de kalibratiefactor is 2 μ).

Meting:

Na kalibratie wordt de micrometer van het platform verwijderd en wordt de microbe, waarvan de afmetingen moeten worden gemeten, in een dia op het podium geplaatst en gefocust. Nu wordt het aantal oculaire delen dat wordt bezet door het micro-organisme geteld. Vervolgens, door dit aantal delen te vermenigvuldigen met de kalibratiefactor, wordt de grootte van de microbe als volgt bepaald.

Als de microbe 6 OD in lengte inneemt, dan is de lengte van de microbe = 6 x kalibratiefactor = 6 x 2 = 12 μ.

Het is mogelijk om de grootte van microben te meten door ze direct te observeren op een micrometer. Dit zou kalibratie en berekeningen voorkomen. Maar de fase-micrometer is een standaardschaal, die kostbaar is vanwege de micro-etsen erop. Als het vaak wordt gebruikt voor directe observatie, raken de etsen ervan versleten.

Bovendien zijn de etsen op de micrometer van het platform op ruimere afstand van elkaar (ongeveer 10 keer) gelegen dan die op de oogmicrometer. De afmetingen kunnen dus niet nauwkeurig worden bepaald met behulp van een micrometer. Dat is de reden; het wordt nooit gebruikt voor directe meting.

Vereiste materialen:

Oculaire micrometer, fase-micrometer, glijbaan, microscoop, microbe.

Procedure:

1. Het oculair wordt van de microscoop verwijderd en het bovenste deksel wordt losgeschroefd. Het deksel is verwijderd. Zorgvuldig wordt de ooglens (figuur 5.15) verwijderd. De oogmicrometer (een cirkelvormig geëtst glasstuk dat in het oogstuk glijdt) wordt voorzichtig in het oculair geplaatst. De ooglens wordt teruggeplaatst en het bovenste ooglid wordt in de oorspronkelijke staat geschroefd. Het oculair wordt terug in de microscoop geplaatst.

2. De stage-micrometer wordt op het podium geklikt en de etsen worden gecentreerd door het mechanische stadium te verplaatsen.

3. Het lage-vermogensdoel wordt in positie gebracht.

4. Het oculair wordt gedraaid totdat de etsen op beide micrometers op elkaar liggen.

5. Het vereiste doel wordt genomen om te positioneren. Het vereiste doel is dat, waarmee het hele micro-organisme kan worden bekeken en het het microscopische veld maximaal bestrijkt.

6. Met het vereiste objectief in positie (voor olie-immersieobjectief wordt een druppel olie op de platformmicrometer geplaatst) wordt het mechanische platform verplaatst, zodat een lijn op de platformmicrometer samenvalt met een lijn op de oogmicrometer. Vervolgens wordt een andere lijn doorzocht op de oogmicrometer, die samenvalt met een andere lijn op de micrometer van het platform. Het aantal delingen tussen de samenvallende lijnen wordt geteld voor beide micrometers.

7. De kalibratiefactor voor het gebruikte doel wordt berekend.

8. Op een vergelijkbare manier worden kalibratiefactoren berekend voor de andere doelstellingen.

9. De platformmicrometer is verwijderd.

10. De dia met de te observeren microbe wordt op het podium geplaatst en gefocust.

11. Het aantal oculaire delen dat door de microbe wordt bedekt, wordt geteld door te kijken door het oculair.

12. De grootte van het micro-organisme wordt bepaald door het aantal oculaire delen dat door de microbe wordt bedekt te vermenigvuldigen met de kalibratiefactor.