Catalase-test op bacteriën om hun vermogen te vinden om waterstofperoxide af te breken (met figuur)

Catalase-test op bacteriën om hun vermogen om waterstofperoxide af te breken (met figuur) te ontdekken!

Beginsel:

Sommige bacteriën hebben het vermogen om waterstofperoxide (H ₂ 0 ₂ ) af te breken tot water (H ₂ O) en zuurstof (0, ↑), omdat ze het enzym 'catalase' kunnen produceren.

De afbraak van waterstofperoxide door catalase wordt aangegeven door bellen van vrij zuurstofgas (0, ↑).

In de catalase-test wordt een lus van de testbacteriën in een druppel waterstofperoxide op een glaasje gebracht. Als de bacterie het vermogen heeft om catalase te produceren, breekt het waterstofperoxide (H ₂ O ₂ ) met water en zuurstof. De productie van zuurstof resulteert in borrelen of schuimen, wat in de druppel kan worden opgemerkt.

Vereiste materialen:

Dia's, absorberend papier, entdraad, bunsenbrander, laminaire stromingskamer, waterstofperoxide (3%), geïsoleerde kolonies of zuivere culturen van bacteriën.

Procedure:

1. Een dia wordt gereinigd onder leidingwater (Figuur 7.18).

2. De dia wordt afgeveegd met absorberend papier en aan de lucht gedroogd.

3. Een druppel waterstofperoxide (3%) wordt in het midden van de dia genomen.

4. Een lus van de testbacteriën wordt aseptisch genomen, bij voorkeur in een laminaire stroomkamer, met behulp van een met vlam gesteriliseerde lus en wordt in de druppel waterstofperoxide op de slede gebracht. De lus wordt gesteriliseerd na elke inoculatie.

opmerkingen:

1. Bubbling of schuimen komt in de druppel voor: Catalase positief.

2. Borrelen of schuimen komt niet in de druppel voor: Catalase-negatief.

Voorzorgsmaatregelen:

Een cultuur van bacteriën uit bloedagar-medium kan niet worden gebruikt voor de katalasetest, omdat bloed catalase bevat en altijd een positief resultaat oplevert. Catalase-negatieve bacteriën hebben de neiging om te sterven in suikervrije media, ofwel omdat ze H ₂ 0 ₂ produceren of omdat H ₂ 0 ₂ accumuleert in de media, wanneer ze worden blootgesteld aan lucht en licht.

Daarom moeten stamculturen van dergelijke bacteriën in het donker worden opgeslagen en is de toegang tot lucht beperkt. Catalase wordt gevonden in bijna alle bacteriën die aëroob kunnen groeien. Aangezien het enzym alleen door levensvatbare bacteriën wordt geproduceerd, kunnen kweken van meer dan 24 uur oud niet worden gebruikt voor de katalasetest.