Nuttige opmerkingen over Enzym-papaïne en enzym-pepsine

Immunoglobuline is proteïne en is over het algemeen resistent tegen spijsvertering door enzymen.

Echter, enzym papaïne en pepsine splitsen de immunoglobulinemoleculen. De fragmenten gegenereerd door papaïne en pepsine zijn bruikbaar voor onderzoek naar de structuur en functies van immunoglobuline. Maar de afsplitsingsplaatsen van deze twee enzymen zijn verschillend (Figuur 9.5).

Fig. 9.5: Schematisch diagram van proteolytische fragmentatie van immunoglobuline door korte behandeling met enzymen papaïne en pepsine.

Enzym papaïne splitst het immunoglobuline aan de N-terminale zijde van de inter-zware keten disulfidebinding en produceert drie fragmenten (twee Fab-fragmenten en één Fc-fragment). Enzym-pepsine splitst het immunoglobuline op het C-terminale gebied en produceert één groot fragment (dat twee Fab-gebieden bevat) dat F (ab ') 2 wordt genoemd . De overgebleven zware ketens aan de C-terminale zijde worden gedigereerd in meerdere kleine peptiden

1. Enzym Papaïne:

Enzym papaïne splitst het scharniergebied aan de N-terminale zijde van de disulfiden van de inter-zware ketens en dit resulteert in de vorming van drie fragmenten. (Twee fragmenten die het variabele gebied bevatten en één fragment dat de CH2- en CH3- gebieden bevat). De twee fragmenten die het variabele gebied bevatten worden genoemd; Fab-fragmenten (dwz fragment-antigeenbinding) omdat ze de antigeenbindingsplaatsen hebben.

Het derde fragment omvat de carboxyl-eindstandige gedeelten van beide zware ketens die bij elkaar worden gehouden door disulfiden. Over het algemeen is de structuur van het derde fragment identiek voor veel verschillende immunoglobulinemoleculen.

Vandaar dat fragmenten van deze typen kunnen worden gekristalliseerd, zelfs als ze uit veel verschillende immunoglobulines bestaan. Dit fragment wordt dus het fragment-kristalliseerbare of Fc-fragment genoemd. De meeste van de secundaire biologische eigenschappen van immunoglobuline hangen af ​​van de sequenties in het Fc-gebied. Dit is ook het gebied dat door de Fc-receptoren op veel celtypen wordt herkend.

2. Enzym Pepsin:

Enzym-pepsine splitst het immunoglobuline aan de carboxy-terminale kant van het scharniergebied, wat resulteert in één groot fragment dat F (ab ') 2 wordt genoemd . De F (ab ') 2 heeft twee Fab-fragmenten verbonden door disulfidebindingen. Het Fc-gebied wordt uitgebreid afgebroken door pepsine en gewoonlijk blijft er geen intact Fc-fragment over na de spijsvertering met pepsine.