Gene Cloning: Belangrijke stappen die betrokken zijn bij het klonen van een gen

Gene Cloning: belangrijke stappen bij het klonen van een gen!

"Somatische cel nucleaire overdracht" of simpelweg "nucleaire overdracht", Het vereist twee soorten cellen. De ene is een somatische cel, die wordt verzameld van het dier dat moet worden gekloond, wat de meest algemene kloonmethode is die bekend staat als de "genetische donor".

Een somatische cel is elke cel anders dan een spermacel of eicel en bevat het volledige DNA of de genetische blauwdruk van het dier waaruit het afkomstig is. Voor kloneringsdoeleinden worden somatische cellen meestal verkregen door een routinematige huidbiopsie uitgevoerd door een dierenarts.

De voor het klonen benodigde cel is een eicel, die wordt verzameld van een vrouw van dezelfde soort (de zogenaamde "eiceldonor"). In het laboratorium onttrekt een wetenschapper de kern van de eicel, en dat is het deel van de cel dat de genen van de eiceldonor bevat. Men steekt vervolgens de somatische cel van de genetische donor in het ei en "smelt" de twee met elektriciteit. Bijgevolg bevat gefuseerd ei het DNA van de genetische donor.

De wetenschappelijke simulatie van het gesmolten ei "activeert" het ei en zorgt ervoor dat het deelt zoals een ei dat zou hebben, als het door een spermacel bevrucht was in conventionele voortplanting. Het geactiveerde ei wordt vervolgens in een kweekmedium geplaatst. Naarmate cellulaire deling in de loop van verscheidene dagen voortduurt, vormt zich een blastocyst (embryo in een vroege fase).

Na ongeveer een week draagt ​​een embryotransfer-specialist de blastocyst over aan een ontvangende vrouw (soms 'surrogaatmoeder' genoemd) waar het zich blijft ontwikkelen. Na een voldragen zwangerschap bevalt de ontvanger van een dier dat in wezen de identieke tweeling is van de genetische donor.

De belangrijkste stappen bij het klonen van een gen zijn:

(i) Bereiding van drager-DNA (vector-DNA).

(ii) Isolatie van het gewenste gen.

(iii) Insertie van het geïsoleerde gen in de vector die resulteert in het rDNA.

(iv) Transformatie van rDNA tot een geschikte gastheer.

(v) Expressie van rDNA dat een gekloond gen is.

Gekleurde afbeeldingen 7.1 (a), (b), (c), (d) en (e) geven de creatie van Dolly weer. Cellen uit de uier van een Finn Dorset-ooi worden in een cultuur met zeer lage concentraties aan voedingsstoffen geplaatst. Aldus uitgehongerd stoppen de cellen met delen en schakelen hun actieve genen uit.

Ondertussen is een onbevuilde eicel genomen van een Schotse Blackface ooi. De kern (met zijn DNA) wordt weggezogen, waardoor een lege eicel overblijft die alle cellulaire machinerie bevat die nodig is om een ​​embryo te produceren.

De twee cellen worden naast elkaar geplaatst en een elektrische puls zorgt ervoor dat ze samensmelten als zeepbellen. Een tweede puls bootst de uitbarsting van energie na bij natuurlijke bevruchting, jump-start celdeling. Na ongeveer zes dagen wordt het resulterende embryo geïmplanteerd in de baarmoeder van een andere Blackface-ooi.

Na een draagtijd krijgt de zwangere Blackface-ooi een baby Finn Dorset-lam, Dolly genaamd, dat genetisch identiek is aan de oorspronkelijke donor. Het door mensen bediende proces van het extraheren van DNA uit een gastheercel en het implanteren ervan om te functioneren in een ander type cel.